明目地黃膠囊是由熟地黃、菊花、枸杞子、石決明等中藥研制而成,具有滋腎、養肝、明目等生理功效。臨床主要用于肝腎陰虛,目澀畏光,目視模糊,迎風流淚的癥狀。中藥作為中華醫藥學的瑰寶日益引起全世界的關注,但由于諸多因素出口占有量不到5 % ,重金屬有害元素超標是其中影響因素之一。近年來,有用原子吸收光譜法對大黃和柴胡中的鋅、銅、鐵等元素進行了測定,其中不包括鉛、鎘。據報道鎘元素有化學致癌作用,進入人體后生成難溶物,影響人體的正常機能,嚴重者發生休克、死亡。隨著中藥國際化進程的日益加速,許多國家對進口中藥材及其中成藥中的重金屬含量均有明確規定。為了保證用藥安全和有效,我們采用微波消解2石墨爐原子吸收分光光度法測定中明目地黃膠囊重金屬鎘的含量,取得了滿意結果。
1 儀器與試藥原子吸收分光光度計,鎘空心陰極燈(衡水寧強光源有限公司) ;熱解涂層石墨管;WR/ BP25TC 微波消解儀; 鎘標準液( GSB G62040290 ,1 000mL ,國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院) ; 明目地黃膠囊(廣東眾生藥業股份有限公司) ;硝酸(優級純廣東汕頭西隴化工廠) ;H2O2 (分析純廣州越秀區新成精細化工廠) ;其他試劑為分析純。
2 方法與結果
211 原子吸收分光光度計的工作條件光源用鎘空心陰極燈,波長為22818nm ,燈電流為3mA ,狹縫012mm ,硝酸鎂作為基體改進劑,進樣體積20μL 。背景校正用氘燈。
212 樣品處理 精密稱取本品內容物015g ,置于消解罐中,加硝酸5mL ,過氧化氫2mL ,擰緊、密封。然后放到微波消解儀中進行消解,微波消解程序(見表2) 。消解完成后,置電熱板上緩慢加熱到硝酸揮盡,繼續濃縮到2～3mL ,放冷,用水轉入25mL 容量瓶,過濾,即得,同時做空白。
213 標準溶液的配制及標準曲線 精密吸取1000μg•mL - 1的鎘標準液1mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為10μg •mL - 1 鎘標準液; 精密吸取4mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為014μg•mL - 1鎘標準液;再分別吸取014μg•mL - 1 鎘標準液0 ,012 ,015 ,110 ,115 ,210mL ,分別置100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為0 ,018 ,210 ,410 ,610 ,810ng•mL - 1的鎘標準系列溶液,在已設定的儀器條件下測定,以濃度(C) 為橫坐標,吸收值(A) 為縱坐標進行回歸,方程為A = 010551 ×C + 010949 ,r = 0199938 , (n = 6) 。
215 精密度試驗 精密吸取011μg•mL - 1鎘標準液2mL 置于100mL 量瓶中,用011mol•L - 1 硝酸溶液稀釋至刻度,搖勻,在已設定的儀器條件下測定,重復5 次,測得鎘的吸光度的RSD 為1155 % (見表3) ,表明儀器精密度良好。
216 穩定性試驗 將同一鎘標準液在相同儀器條件下,分別于0 ,2 ,4 ,6 ,8 ,16 和24 h 重復測定,測得鎘的吸光度的RSD為0163 %(見表4) ,表明鎘在24 h 內測定結果穩定。
217 重復性試驗 按樣品測定項下方法,對同一批號樣品(070801) ,分別取樣平行測定5 次,求得鎘含量的相對標準偏差RSD 為2109 % , 1 、2 、3 、4 、5 次的鎘含量(ppm) 分別為0156 、0153 、0154 、0154 、0155 ,表明重復性較好。
218 加樣回收試驗 驗精密稱取約015g 明目地黃膠囊內容物,加入Cd 標準液,按“213”項下方法依次操作,進樣20μL ,以Cd 的吸光度值代入回歸方程計算回收率,平均回收率為 95138 % ,RSD 為210 %(n = 5) 。
219 樣品測定 取明目地黃膠囊3批,分別精密稱取約015g內容物于消解罐中,按“213”項下方法依次操作,進樣20μL ,以鎘的吸光度值代入回歸方程計算含量,結果3 個樣品批號為070801 、070802 、070803 的鎘含量(ppm) 分別為0154 、0156 、0152 。 3 討論
311 石墨爐原子吸收法與火焰原子吸收法相比,具有靈敏度高,試樣用量小等優點,尤其適合痕量元素的分析。石墨爐法測定前處理簡便,結果準確,精密度好。火焰法前處理要用到甲基異丁酮萃取,毒性較大,而石墨爐法不需用有機溶劑萃取。石墨爐法檢出限最低為4 ×10 - 13 g , 上機檢測達μg•kg - 1 ,火焰法上機檢測為mg•kg - 1 。故本方法選用石墨爐原子吸收法進行測量
312 由于明目地黃膠囊包括的藥材比較復雜,在測定中產生強烈的背景干擾,因此要盡可能多地除掉基體物質,減少基體干擾。鎘屬于低溫揮發性元素,在灰化階段易損失,加基體改進劑后,可以提高鎘的灰化溫度,在原子化階段分解為金屬原子而不致損失。鎘的基體改進劑有硝酸、重鉻酸鉀、磷酸銨、磷酸二氫銨、硝酸銨、硝酸鎂等。對不同的基體改進劑進行了試驗,選擇硝酸鎂作為測定鎘的基體改進劑。并且在選定的優化條件下,提高灰化溫度,可以有效地消除了背景干擾,改善了原子化吸收峰,提高了靈敏度,使結果更加準確。
313 本實驗對不同量的硝酸及過氧化氫用量組合進行了分析。結果發現,隨著硝酸使用量的增加,樣品消化越完全。但是硝酸的殘留越多對測定結果影響很大。因此,微波消解后, 一定要盡量全部去掉消解液中殘留的硝酸,否則會導致結果不準, 并縮短石墨管的壽命, 經過試驗, 我們選定加硝酸5mL ,過氧化氫2mL ,達到了比較理想的效果。
314 以上結果表明利用微波消解處理樣品,使得樣品的前處理過程大大縮短,且節省試劑。減少環境污染,方法準確,靈敏快速,非常適合用于明目地黃膠囊中鎘金屬元素的測定分析。
